1.2.6.4 玫瑰茄花果茶氧自由基吸收能力测定

将袋泡茶浸出茶汤分别稀释适宜倍数后作为待测样品，根据参考资料[25-27]，向96孔板各孔加入25 mL不同浓度Trolox标准品溶液（或样品），空白以缓冲液代替，以及随后每孔加入150 mL 荧光试剂，37℃孵育20 min。测定时加入25 mL AAPH溶液启动反应，将96孔板置于预热至37℃酶标仪中5 min，以激发波长(485±20) nm, 发射波长(530±20) nm 进行连续测定荧光强度, 测定时间设定在荧光衰减呈基线后为止，检测时间大约为2 h。

 

试验所得的各微孔不同时间点的绝对荧光强度数据与其初始时间的荧光强度相比, 折算成相对荧光强度f，以相对荧光强度采用近似积分法计算荧光衰退曲线下面积 (AUC) 。其公式为 : AUC=0.5×[2×(f0+f1+…+fn-1+fn)-f0-fn]×△t，其中，fn标示第n个测定点的相对荧光强度, △t表示相邻两个时间点之间的时间间隔(即2 min), 则上述公式可简化为: AUC=2×(f0+f1+…+fn-1+fn)-f0-fn。

 

ORAC值=[(AUC样品—AUC空白)/(AUC Trolox—AUC空白)]×(Trolox浓度(µmol/L)/样品浓度(g/L))