2.3 病原菌形态学鉴定

图2所示，在PDA培养基上25℃光照培养，菌落以1.1 cm/d的速度生长，在7 d后，菌落直径达8 cm。PDA培养基上生长较快，气生菌丝白色薄绒状，菌落生长后期可产生黑色分生孢子堆，分生孢子近椭圆形，无隔膜，大小为 (19.35~40.62) μm×(5.32~9.20) μm。附着孢单生，光滑，近梨形或倒梨形，(13.20~16.82) μm×(7.53~9.78) μm。它的菌落形态、分生孢子盘及分生孢子与已报道的博宁炭疽菌 (C. boninense)^[8]形态一致。

2.4 病原菌分子生物学鉴定

将获得的供试菌株的ITS、GADPH、CHS-1和ACT基因序列提交至Genbank，序列登录号分别为MN542218，MN542219，MN542220和MN542221，并以此构建多基因系统发育树。如图3所示，供试菌株HL8与菌株CBS123755聚集于一支，且支持率达96%，能与其他种明显区分开。将4个基因序列同菌株CBS123755 (JQ005153、JQ005240、JQ005501和JQ005327)进行blast，发现ITS、GADPH、CHS-1和ACT基因的同源性分别为99.42% (512/515核苷酸)、100% (251/251核苷酸)、99.27% (273/275核苷酸)和99.29% (278/280核苷酸)。因此，结合菌株形态学特征和分子生物学鉴定，将病原菌鉴定为博宁炭疽菌 (C. boninense)。