2.2 ADAM15在肺癌细胞株和肺癌组织中呈高表达 我们通过western blot检测ADAM15在正常肺上皮细胞株BEAS-2B和肺癌细胞株A549、H1299、SPC、H460中相对表达水平(图2A)。由于ADAM15在H460细胞株中表达较高,故我们选择H460细胞株进行后续实验。我们使用实时定量PCR在肺癌组织和相应的癌旁组织中也检测ADAM15的表达,结果如图2B,在20对肺癌组织和相应的癌旁组织中,ADAM15在13对肺癌组织中呈高表达,占比65%(t=2.2,P<0.05)。
2.3 ADAM15促进H460细胞的增殖,迁移和侵袭 在H460细胞中干扰ADAM15, CCK-8实验表明,si-ADAM15-1组(t48h=15.87, t72h=15.74, 均P< 0.001)和si-ADAM15-2组(t48h=13.13,t72h=11.35, 均P<0.01)H460细胞增殖能力较NC组更慢(图3A)。划痕实验我们发现与对照组相比,si-ADAM15-1组(t=3.347, P=0.029)和si-ADAM15-2组(t=4.603, P=0.01)H460细胞迁移的距离较NC组更短(图3B)。Transwell迁移(migration)实验表明si-ADAM15-1组 (t=19.060, P<0.001)和si-ADAM15-2组的迁移细胞数 (t=15.520, P<0.001)较NC组明显较少, 侵袭(Invasion)实验也表明si-ADAM15-1组 (t=12.610, P<0.001)和si-ADAM15-2组 (t=9.155, P<0.001)的迁移细胞数也较NC组显著减少。(图3C)。