1.2.2 骨髓间充质干细胞的成骨分化  骨髓间充质干细胞BMSCs铺板于6孔细胞培养板生长至细胞密度为1×10⁴个/孔。经含10%胎牛血清、50 μmol/L抗坏血酸 (Sigma)、0.1 μmol/L DMSO和10 mmol/Lb-甘油磷酸酯 (Sigma)的α-MEM诱导BMSCs细胞向成骨细胞分化7d。

1.2.3  细胞转染  分别设置miR-124-3p mimics组与阴性对照 (miR-124-3p NC)组，待BMSCs细胞培养至对数生长期时，使用胰酶消化细胞后，洗涤2遍后应用完全培养基将细胞调至3.0×10⁶ 个/mL，取200 µL细胞液接种至corning 6孔板中培养24 h。分别向三个EP管中加入5 μL LipofectamineTM2000，5 μL LipofectamineTM2000 +阴性质粒miR-124-3p NC，5 μL LipofectamineTM2000 + 5 μL miR-124-3p mimics，室温静置5 min后混合，加入不含血清的DMEM培养基调整终体积至2 mL，置于37℃、5% CO₂、饱和湿度下培养6 h后，更换完全培养基继续培养，完成BMSCs细胞转染，并继续扩大培养以用于后续实验。