2.4净化条件的选择

该类样品一般含有多种植物提取物，成分较复杂，基质干扰较大，故采用Oasis® HLB 固相萃取柱净化样品，固相萃取的过程为上样、淋洗杂质、洗脱被测物。上样和淋洗过程中不能有雌性激素被洗脱下来，而提取溶液为纯甲醇，因此上样前需加水将样品稀释，杂质淋洗采用乙腈/水,本实验考察了不同比例(50%,30%,10%)乙腈/水作为淋洗液对回收率的影响。结果表明，有机相的比例直接影响小柱的吸附效果，乙腈比例越高，回收率越差，乙腈浓度为10 %时回收率最佳。因此选择10 %的乙腈/水溶液作为淋洗溶液能到达理想的净化效果,且不会明显降低待测物的回收率。

2.5 曲线方程与检出限

在1.4仪器工作条件下，对系列混合标准工作溶液进行测定，以待测化合物的质量浓度(x)为横坐标，以峰面积(y)为纵坐标，绘制标准工作曲线，以大于3倍信噪比( S/N＞3) 对应的浓度作为方法检出限。20种雌性激素的线性范围、线性方程、相关系数及检出限见表6。由表6可知，雌三醇，地诺孕素，雌二醇，炔雌醇，马烯雌酮，雌酮，四烯雌酮，尼尔雌醇的质量浓度在1.0μg/mL～40μg/mL；炔诺酮，孕二烯酮，己烯雌酚，依托孕烯，黄体酮，醋酸甲地孕酮，醋酸甲羟孕酮，醋酸氯地孕酮，苯甲酸雌二醇，己酸羟孕酮的质量浓度在0.5 μg/mL～20μg/mL； 己二烯雌酚，去氢孕酮的质量浓度在0.25 μg/mL～10μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数均大于0.995，方法检出限为0.02～0.10 μg/ml。