紫外分光光度仪检测RNA的纯度以及浓度
更新日期:2021-04-13     浏览次数:156
核心提示:1.2.5 细胞总RNA提取 弃去细胞上清,1去细胞上润洗两次,每孔加入500ul的Trizol试剂。使用移液器收集细胞裂解液加入到RNAase-free的EP管,200uL氯仿,

1.2.5 细胞总RNA提取
      弃去细胞上清,1去细胞上润洗两次,每孔加入500ul的Trizol试剂。使用移液器收集细胞裂解液加入到RNAase-free的EP管,200uL氯仿,上下颠倒混匀。冰上静置5min后,使用低温冰冻离心机,12000rpm离心10min。离心后液体分为三层,小心吸取上层无色液体到新RNAase-free的EP管。接着取等体积的异丙醇混匀,离心后倒掉上清,并使用RNAase-free吸头去除多余上清,加入1mL的75%乙醇洗涤沉淀物,7500rpm低温离心5min,同样方法两次。弃去上清后低温离心,7500rpm离心5min。室温放置5-10min使乙醇挥发。加入适量的DEPC水溶解总RNA,-80总超低温存放。紫外分光光度仪检测RNA的纯度以及浓度。