1.2.2 RTCA法检测细胞毒性

将对数生长期的H292细胞用胰酶消化后配置成5×10⁴/ml的细胞悬液，用于RTCA法进行细胞毒性检测。向RTCA配套的E-plate-16细胞增殖板中加入100ul配置好的细胞悬液，即每孔接种5000个细胞后，于37℃，5%CO₂培养箱中培养24h待其贴壁牢固。24h后进行基线测定，然后弃去上清，按照设定的浓度梯度加入不同浓度的含苯并芘的1640培养基。浓度梯度依次为：0/对照、4、8、16 和32μM。用RTCA仪器继续进行测定，并在仪器上设置为每隔15min检测一次细胞指数（cell index,CI），连续测定72h以上。实验停止后，将实验检测的结果导出以便用于后续计算。最终的结果用细胞存活率表示，即对应时间点下测定浓度的CI值与空白对照组的CI值的百分比。根据GB /T 16886.5—2017规定细胞活性下降大于30%被认为有细胞毒性。