核心提示:3. 细胞增殖和集落形成活性 为了敲低 COP1 表达,将 H1299 和 H460 细胞以 8104 的密度铺在 6 孔板 中,并培养 24 小时。 使 用 lipofectamineTM 3000
3. 细胞增殖和集落形成活性 为了敲低 COP1 表达,将 H1299 和 H460 细胞以 8×104 的密度铺在 6 孔板 中,并培养 24 小时。 使 用 lipofectamineTM 3000 试剂将 siCOP1 ( 5'- GUUAAGAUGUUGAGUACUG-3')转染人 H1299 和 H460 细胞,并通过 Incucyte 仪器观测细胞增殖。通过将转染了阴性对照或 COP1 特异性 siRNA 的 H1299 或 H460 细胞接种到 35 毫米平板(每平板 400 个细胞)上,一式三份,促进灶形成。 培养 14 天后,将细胞用结晶紫染料染色,并计数含有 50 个以上细胞的克隆,统计数据并估计集落形成活性。