（1）配置芒果花粉培养液：将蔗糖150g，硼酸150mg，硫酸钙6.0mg，硫酸镁100mg，硝酸钾100mg，聚乙二醇250g混合，定溶至1升。将培养液加热煮沸待其充分溶解，冷却后装瓶常温保存备用即可。

（2）采集花粉与预处理：将配置好的培养液分装在500ul的离心管中，每个离心管里随机采取12-15粒花药，充分震荡使花药上的花粉附着于培养液中。

（3）不同温度条件下花粉离体培养：将离心管分别存放于14℃、16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃的培养箱中分别进行1h、3h、5h的高、低温持续刺激。

（4）不同温度条件下花粉萌发率的测定：取干净凹面载玻片，向凹穴滴入1-2滴混合均匀的培养液进行观察，每个处理重复3次，每重复随机选取5个视野，共观察200～500个花粉粒。以花粉管长度超过花粉粒直径为花粉萌发标准，分别观察1h、3h、5h连续刺激下不同温度梯度的萌发花粉数、花粉总数并统计萌发率等花粉萌发情况。