2.3.2抑菌活性的复筛
按照“2.3.1”项同样方式制备混菌平板。
取阳性对照药品两性霉素B、氨苄青霉素钠、硫酸庆大霉素适量,加入DMSO,分别制成2 .00mg/mL溶液。无菌条件下,取上述对照溶液及复筛试验样品溶液润湿后的滤纸片,放至混菌平板上,供试细菌35~37 ℃培养18~24 h,供试真菌20~25 ℃培养24~48 h,用游标卡尺测量抑菌圈的直径,计算相对抑菌率。相对抑菌率=(样品平均抑菌直径-阴性对照平均抑菌直径)/ 阳性对照平均抑菌直径×100%。
2.3.3最小抑菌浓度的确定(MIC)
按照“2.3.1”项同样方式制备混菌平板。
取复筛药物适量配制成2.0 mg/mL、1.0 mg/mL、0.5 mg/mL、0.25 mg/mL浓度梯度的溶液,按照“2.3.1”项同种方式制备混菌平板。取上述浓度复筛药物溶液润湿后的滤纸片置于培养皿中,培养24 h,测量抑菌圈直径,并确定最小抑菌浓度。