2 内生菌筛选与鉴定技术
植物内生菌在植物中广泛分布[15],保守估计仅植物内生真菌有100多万种[16]。很多内生菌受到植物代谢的影响,其生活环境发生了较大的变化,虽然在外观上没有较大差异,但是其内生菌的基因型却不尽相同[17-19]。从植物内生菌分离的角度来讲,分离鉴定最常用的培基有PDA培养基、马丁氏培养基、麦芽汁培养基、牛肉膏蛋白胨培养基、曲汁培养基、高氏一号等。根据样品和筛选功能菌种的需要可选择适当的培养基, 一般分离土壤样用PDA、分离食品样品多用麦芽汁琼脂、分离真菌类多用PDA[20]、而分离水中常常用高氏一号[20]。国内常用的分离培养基有马铃薯葡萄糖培养基(PDA) 、察氏培养基和马丁氏培养基等;而在国外, 最常用的是麦芽浸膏琼脂培养基。从分离筛选角度来讲,培养基又可分为分离培养基和纯化培养基。分离培养基通常要添加青霉素和硫酸链霉素;而纯化培养基通常是不加任何抗生素的培养基。常用的表面消毒方法有75%酒精加次氯酸钠浸泡消毒或酒精加升汞浸泡消毒[21]。在细菌的分离上常用的方法有印迹法、组织分离法和研磨法[22];