1.5 黑曲霉菌种的活化与发酵培养
1.5.1 黑曲霉菌种的活化[1-4]:将08016菌株接种于初筛培养基中,28℃培养2d,再转种于诱导培养基中,28℃培养2d。
1.5.2 黑曲霉的发酵培养:在诱导培养基中取3环菌株孢子,加入到装有发酵培养基(72mL)的三角瓶(250mL)中,在30℃、150r/min摇瓶柜中培养24h,测定发酵液中的酶活力。
1.6 发酵液内切型菊粉酶酶活力的测定
内切型菊粉酶活力单位的定义为[2-6]:在pH 5、50℃的条件下,每min水解菊糖生成1μmol的还原糖,所需用的酶量为一个酶活力单位。
发酵液内切型菊粉酶酶活的测定方法: 把发酵液离心过滤后, 取粗酶液1.0 mL , 加4.0 mL的菊糖溶液, 在50℃条件下作用10 min, 用3, 5-二硝基水杨酸法测定还原糖生成量,再通过葡萄糖含量的线性方程, 计算出酶活。