2.2  单因素试验

反应时间15min内，供试品溶液吸光度明显增大；反应时间大于15min后，供试品溶液吸光度开始缓慢上升。因此，确定最佳反应时间为15 min。反应温度75℃内，供试品溶液吸光度明显增大；反应温度大于75℃后，供试品溶液吸光度缓慢上升。故选择最佳反应温度为75℃。5%香草醛-冰醋酸用量在0.4ml内，供试品溶液吸光度明显增大；5%香草醛-冰醋酸用量在大于0.4ml后，供试品溶液吸光度开始降低。因此，确定最佳5%香草醛-冰醋酸用量为0.4 ml。80%浓硫酸用量在1.0ml内，供试品溶液吸光度明显下降。因此，确定的最佳80%浓硫酸用量为0.6 ml。从图2E中可以看出，冰浴时间20min内，供试品溶液吸光度明显增大；冰浴时间在大于20min后，供试品溶液吸光度开始降低。因此，确定的最佳冰浴时间为20min。显著影响供试品溶液总皂苷含量测定的因素只有香草醛用量，其他4个因素具有最佳值或者影响不显著，因此，不需要进一步利用响应面实验优化其洋葱总皂苷含量测定的显色条件。