1.4.3大麦虫脂类粗提物体外抑菌和肠道微生物16srDNA测序
称取一定量的大麦虫,按重量与体积1:5的比例加入有机溶剂,3天后取走过滤液,幼虫粉渣再按1:3加入有机溶剂,浸泡3天后过滤,用旋转蒸发仪对过滤液进行浓缩得到大麦虫脂类提取物。质控菌株大肠埃希菌(ATCC25922,G-)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923,G+)购于广东省微生物菌种保藏中心;致病性菌株鸡大肠杆菌(O78,G-)和鸡沙门氏菌(G-)为广东省农业科学院动物卫生研究所惠赠。采用牛津杯法进行体外抗菌活性检测。在培养皿中注入适量加热融化的MH培养基,作为底层。待凝固后,取50℃左右的培养基100mL,加入100 μL实验菌悬液(106 cfu/mL),摇匀,适量倒至底层上,作为菌层。待菌层冷却后,将牛津杯均匀放置平板上,向牛津杯中加入100 μL 500mg/mL的大麦虫提取液。37℃恒温培养18-24h观察结果、拍照及测量抑菌圈直径大小(mm)。通过游标卡尺测量抑菌直径定性检测抑菌活性效果。