1.3.4运用AnnexinⅤ-FITC/PI荧光染色检测细胞凋亡

待L-929细胞在a、b、c、d各组浸提液中培养48h后，吸出各孔中的钴铬合金浸提液，用不含EDTA的0.25%胰酶对细胞进行消化3min，将消化下来的细胞悬液与各孔吸出的钴铬合金浸提液一起离心，1000rmp 5min,pbs洗涤两次，加入500μL 的Binding Buffer 悬浮细胞； 加入5μL Annexin V-FITC 混匀后，加入5 μL Propidium Iodide，混匀,室温、避光、反应5～15min，在1h内用流式细胞仪检测，流式细胞仪激光波长用488nm,用一波长为515nm通道滤器检测FITC，另一波长大于560nm的滤器检测PI。重复3次取平均值，观察各组细胞流式细胞仪散点图，计算每组细胞凋亡率。