采用分光光度法检测细胞能量代谢过程中代谢产物
更新日期:2021-06-23     浏览次数:135
核心提示:2.4分光光度试剂盒检测细胞能量代谢产物含有量及相关酶活力将2105/mL对数生长期的HepG2细胞、HUVEC细胞。CO2培养箱中37℃培养24 h。实验组加入浓度为2

2.4分光光度试剂盒检测细胞能量代谢产物含有量及相关酶活力

将2×105 /mL对数生长期的HepG2细胞、HUVEC细胞。CO2培养箱中37℃培养24 h。实验组加入浓度为25 μg/mL的白桦脂醇、空白对照组加入同等质量的无血清DMEM,培养48 h,制成细胞悬液,离心5 min后弃上清,用0.9%生理盐水洗涤细胞,制成细胞悬液,手动匀浆后,应用BCA法绘制标准曲线,测定HepG2细胞和HUVEC细胞的蛋白浓度,取实验组和对照组制备的细胞悬液,采用分光光度法检测细胞能量代谢过程中代谢产物LD、ATP的含有量,糖酵解和氧化磷酸化的酶GOD、HK、PK、LDH活力,具体方法和操作均按照指定试剂盒中说明书进行。