1.2.1细胞转染
BGC-823细胞接种于6孔板,置于5% CO2、37℃培养6小时后进行转染。在适量的不包含血清的Opti-MEM低血清培养基中稀释miR-100模拟剂(mimics)以及对照(mock),轻轻混匀。接着在使用前轻轻混合LipofectamineTM 2000,然后稀释适量的试剂到Opti-MEM低血清培养基,轻轻混匀后在室温下孵育5分钟。孵育5分钟后,混合稀释的寡聚物和稀释的LipofectamineTM 2000,轻轻混合,在室温下孵育20分钟,以便允许复合物的形成。最后将转染复合体(siRNA-LipofectamineTM2000复合物)加入到每一个包含细胞和培养基的孔中。通过轻轻地前后摇动培养板混合。在37℃、5%CO2培养箱孵育,按相应试验需要收集细胞。