1.4.3.1 皮肤组织及血样取材
小鼠被处死后,用手术剪取小鼠腹背部一整块新鲜皮肤组织,置于生理盐水中清洗2-3次后用滤纸吸干,然后置于离心管内并储存于液氮中待测。
1.4.3.2 皮肤中SOD活力的测定
采用超氧化物歧化酶试剂盒测定SOD的活力。测定原理:通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应产生O2-,进一步氧化测试中加入的羟胺,生成亚硝酸盐,而亚硝酸在显色剂作用下显色,在SOD活力较高时,将减弱上述过程,导致其吸光度值更低,具体操作步骤按照试剂盒说明书进行。
1.4.3.3 皮肤中MDA活力的测定
采用丙二醛类似物试剂盒(TBA比色法)测定皮肤中MDA类似物含量。测定原理:MDA类似物为脂质过氧化物,能够与硫代巴比妥酸(TBA)反应并生成红色物质,其在532 nm处具有较强的吸收,因此MDA类似物的含量与反应体系在532 nm的吸光度值呈正相关,具体操作步骤按照试剂盒说明书进行。