1.3.1 细菌的培养 取冻存的菌株,接种于TSA琼脂平板中,于37℃恒温箱中培养24h,挑取单个菌落接种于TSB培养基中,置于37℃恒温培养箱中震荡培养8h,采用平板计数法测定细菌浓度,并将菌液保存备用。
1.3.2 AgNPs对猪链球菌最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定 参考Swolana D等[6]的方法并做一些调整,采用微量肉汤稀释法,将纳米银倍比稀释,依次加入96孔板中,每孔100μL,将上述菌液浓度调整到1×106CFU/mL,每孔加入100μL,使菌的终浓度为5×105CFU/mL。每个板上均设置无菌控制以及生长控制。放入温箱中37℃培养24h,以肉眼观察,无菌生长的最低浓度孔即为纳米银对猪链球菌的MIC。从MIC终点孔到第1孔中分别吸取50μL液 体接种于TSB平板上,37 ℃温箱中孵育24h。观察结果,接种平板中未见菌体生长的最低药物浓度为纳米银对猪链球菌的MBC。