2.2 流动相的选择
比较了乙腈/0.1%三氟乙酸、乙腈/醋酸铵溶液作为流动相时肌肽的分离情况。结果表示,乙腈/0.1%三氟乙酸为流动相时,L-肌肽在色谱柱上的保留较弱(保留时间为1.3min)且峰拖尾严重。乙腈/醋酸铵溶液作为流动相时,L-肌肽在色谱柱上有良好的保留,色谱峰形良好。
笔者考察了乙腈/醋酸铵溶液体系中醋酸铵浓度和pH值的影响。醋酸铵浓度分别考察了10mM和20mM,pH值分别用冰乙酸调至3.5和4.0。结果表明,当乙腈/醋酸铵溶液比例为60:40(V:V)时,L-肌肽在色谱柱上有良好的保留,醋酸铵浓度10mM与20mM的差异不大,考虑到有机相比例大,防止缓冲盐的析出,故选择10mM浓度的醋酸铵溶液;醋酸铵溶液pH值的影响不是很明显,pH3.5和4.0都可以满足实验需求。