1. 6. 1粪肠球菌的灭活  将活化的粪肠球菌N41菌株培养物调整至1×10⁸ cfu/mL，装入50 mL离心管中，以5000 r/min离心20 min，弃上清，用等体积0. 4%甲醛溶液重悬，置37 ℃恒温箱24 h进行灭活。为验证甲醛的灭活效果，可取500 μL甲醛灭活菌液涂布于BHI培养基并于37 ℃培养18-24 h，观察平板上有无菌落产生。

1. 6. 2粪肠球菌抗体的制备  将经甲醛灭活的粪肠球菌N41菌液与弗氏佐剂进行1:1混合后， 接种6周龄新西兰大白兔，方式为多点皮下注射，免疫菌数为1×10⁸ cfu/只，每间隔2周免疫1次，共接种3次，首次免疫佐剂使用弗氏完全佐剂，之后使用弗氏不完全佐剂，第3次免疫完成后间隔1周进行心脏采血，分离制备阳性血清；同时抽取健康未免疫的6周龄新西兰大白兔血液，分离兔血清，于-20 ℃保存。将灭活粪肠球菌菌体以1×10⁸ cfu/mL包被于96孔微量酶标板中，37 ℃湿盒放置2 h、4 ℃过夜，以免疫后的阳性血清为一抗，使用TMB双组分显色液，在OD450 mm处读取光密度数值，以检测抗体效价。