1.2.2 超低温保存

将不同含水量的种子分别用玻璃化冷冻法、缓慢冷冻法、直接冷冻法进行超低温保存24 h。其中玻璃化法超低温保存是用装载液LS溶液（每升MS溶液中含2 mol甘油和0.4 mol蔗糖）于25℃浸泡处理种子20 min，再用玻璃化保护溶液PVS₂（每升MS溶液中含30%甘油、0.4 mol蔗糖、15%乙二醇和15%二甲亚砜）冰浴处理种子30 min，换上预冷新鲜的PVS₂后迅速投入液氮中进行超低温保存；缓慢冷冻法超低温保存是用玻璃化保护溶液PVS₂在4℃下处理种子30 min，再转移至-20℃冰箱中冷冻处理1 h，取出后迅速投入液氮中进行超低温保存；直接冷冻法超低温保存是将种子直接投入液氮中进行超低温保存。