2.3  试验方法

取适量的粪便与灭菌 PBS 缓冲液（PH 7.2）按 1:5 的比例制成混悬液，将其置于 -80℃ 超低温中反复冻融 3 次后，于 4℃ 的台式高速冷冻医用离心机中以 8000g/min 离心 10 min，取其上清液再用 0.22 µm 微孔径过滤器过滤，过滤好的混悬液取 300 µL 严格按照 TRIzol^TM Reagent 试剂盒说明书的方法提取样本总 RNA，全程在 4℃ 下操作（以保证所提取的核酸未被降解），提取的总 RNA 严格按照 Primescript^TM RT Master Mix 试剂盒说明书的方法反转录成 cDNA，置于 -20℃ 冰箱中以备后用。同时，用酚—氯仿法提取细菌的 DNA，保存于 4℃ 冰箱。