1.3 转基因烟草的鉴定
经过潮霉素初步筛选后,随机选取6株转ADSpro植株,提取DNA并以其为模板,进行PCR扩增。结果显示抗性植株扩增出的片段长度均与阳性对照一致,符合预期大小。而野生型烟草未检测到目的片段。说明成功获得了转ADSpro阳性植株。
经过潮霉素初步筛选后,随机选取10株转DBR2pro::GUS植株,提取DNA并以其为模板,进行PCR扩增。结果显示抗性植株1,2,3,4,6,7,8,9,10扩增出的片段长度均与阳性对照一致,符合预期大小。而野生型烟草未检测到目的片段。说明成功获得了转DBR2pro阳性植株。
1.4 GUS检测结果与分析
对分子鉴定为阳性的烟草株系进行组织化学染色,结果显示,野生型WS38的对照植株没有检测出GUS活性。与对照植株相比,转ADSpro::GUS的烟草植株在腺毛处呈现出蓝色,主叶脉也染上一定的GUS反应,呈现淡淡的蓝色 。说明黄花蒿ADS基因启动子在转基因烟草中表达,具有比较明显的腺毛表达的组织特异性,同时在叶片主脉中有低水平表达。