1.3.5 乳酸菌的抑菌性能研究
指示菌以金黄色葡萄球菌为例,大肠杆菌和沙门氏菌试验方法参照金黄色葡萄球菌。配置固体金黄色葡萄球菌培养基,121 ℃灭菌15 min后取出倒平板,待凝固后于4 ℃保存备用。
金黄色葡萄球菌菌悬液的配置:将金黄色葡萄球菌接种于灭菌后的LB液体培养基中,放置在37 ℃恒温培养24 h后取出放入4 ℃冰箱备用。
将2 %的食物乳杆菌、植物乳杆菌和类干酪乳杆菌三株菌的发酵液接种培养24 h后于4 ℃,12000 r/min离心10 min,取发酵上清液4 ℃保存备用。用移液枪取200 µL稀释后的指示菌液于相应的指示菌培养基上并均匀涂布在平板表面,轻轻放上牛津杯(牛津杯既不能集中放,也不能放在平板的边缘,均匀放置);用移液枪向牛津杯中加入100 µL发酵上清液,对照用不加菌株的空白发酵液。放置在37 ℃恒温培养箱中培养18 h后观察抑菌圈大小,用游标卡尺测量抑菌圈大小,每株菌平行测定三次,结果取平均值,比较三株菌的抑菌圈大小。