1.3.1组织芯片制作
首先在HE切片上选取具有代表性的浆液性卵巢癌组织,在相应的蜡块标本上标记,选定穿刺点,用穿刺针采集所选组织,按照6×8的序列将其整齐的注入在蜡块列阵中。使用切片机以4μm厚度进行连续切片。
1.3.2免疫组织化学染色
按上述方法获得组织芯片蜡块,取切片置于75℃恒温烤箱中烘烤60min,然后放入二甲苯溶液中脱蜡,然后依次浸入梯度酒精中脱水,然后用水冲洗,然后将切片置于煮沸的EDTA溶液中修复20min;冷却至室温后放入湿盒中加适量3%H202封闭处理,PBS冲洗。按比例滴加稀释好的一抗,包括ING4(1:600)、p21(1:200)、p53(即用型)、ER(即用型)、PR(即用型),37℃孵育60min, PBS冲洗。滴加即用型二抗,37℃孵育30min,PBS冲洗。DAB显色,苏木素复染后封片、晾干。