2.1.1 牙周膜细胞与纤维膜复合培养
将纤维膜剪成12孔板大小的圆片,置于12孔板中紫外线消毒2h,然后采用75%酒精溶液浸泡2h,PBS溶液漂洗2次,DMEM培养液浸泡24h,最后弃去上层培养液。以2×104/孔的密度将牙周膜细胞分别接种到SEP/PLGA纤维层、PCL纤维层,培养板,细胞培养板作为空白对照。培养3天、7天后分别取出样品,使用3%戊二醛溶液固定,PBS漂洗,梯度乙醇脱水处理,CO2临界点干燥、固定,表面喷金后扫描电镜观察。
2.1.2 MTT 检测细胞增殖能力
牙周膜细胞与双层纤维膜分别复合培养1天、3天、5天、7天后,向培养板中加入 MTT溶液200μl(5mg/ml),继续培养4小时,弃除孔内上清液,添加DMSO(150μl)于培养板中,小心避光振荡10min,使结晶物充分溶解,在酶联免疫检测仪上测定每孔490nm处的吸光度值,每组6个样本。