1.2.1 菌株分离纯化
取医药废水污水处理厂活性污泥4 ℃保存。实验时将活性污泥与无菌水混合制成悬液,取1%(v/v)悬液置于含100 mL异养硝化培养基的250 mL锥形瓶中,30℃、170 r/min培养48 h,后取2 mL富集液再培养一次。以10-4~10-8稀释梯度下100 μL已富集菌液均匀涂布于异养硝化培养基固体平板, 30℃倒置培养, 长出后3次纯化分离得到单菌落于斜面保存。将初筛菌株接种于反硝化鉴定培养平板,若观察到平板由黄变蓝,初步认为菌株具反硝化能力。将复筛菌株富集活化后的菌液离心并用0.8%无菌盐溶液悬浮稀释至OD600约为1.0,以1%(v/v)接种量接于装有100 mL异养硝化培养基的250 mL锥形瓶中,于恒温摇床170 r/min、30 ℃培养48 h。每6h取样用纳氏试剂检测氨氮浓度的变化情况,选取硝化能力好的菌株,将其划入斜面暂时保存并悬浮在20%甘油中于-80 ℃下保存备用。