1.2.1 菌株分离纯化

取医药废水污水处理厂活性污泥4 ℃保存。实验时将活性污泥与无菌水混合制成悬液，取1%（v/v）悬液置于含100 mL异养硝化培养基的250 mL锥形瓶中，30℃、170 r/min培养48 h，后取2 mL富集液再培养一次。以10^-4～10^-8稀释梯度下100 μL已富集菌液均匀涂布于异养硝化培养基固体平板， 30℃倒置培养， 长出后3次纯化分离得到单菌落于斜面保存。将初筛菌株接种于反硝化鉴定培养平板，若观察到平板由黄变蓝，初步认为菌株具反硝化能力。将复筛菌株富集活化后的菌液离心并用0.8%无菌盐溶液悬浮稀释至OD₆₀₀约为1.0，以1%（v/v）接种量接于装有100 mL异养硝化培养基的250 mL锥形瓶中，于恒温摇床170 r/min、30 ℃培养48 h。每6h取样用纳氏试剂检测氨氮浓度的变化情况，选取硝化能力好的菌株，将其划入斜面暂时保存并悬浮在20%甘油中于-80 ℃下保存备用。