1.6实时荧光定量PCR

收集来自广西医科大学附属肿瘤医院总共十对HCC组织和邻近癌旁组织。采样时间为2018年6月~2020年9月。本研究获得广西医科大学伦理委员会批准。所有患者均提供知情同意。Trizol试剂提取肝细胞癌组织和癌旁组织中的总RNA。用Takala反转录试剂盒(RR047A)将总RNA逆转录为cDNA，然后用Takala试剂盒（RR820A）进行PCR扩增。引物序列：ATP1B3正向5'-TCATCTACAACCCGACCACCG-3'，反向5'-GAGTCTGAAGCATAACCCACATC-3'；ENAH正向5'-TGACTATTGTGCTGTCTGCTGC-3'，反向5'-AAAGGTTCACTGCTGACTCCC-3'；ACTB正向5'-AGATCAAGATCATTGCTCCTCCTG-3'，反向5'-AGTCATAGTCCGCCTAGAAGCAT-3'。ATP1B3和ENAH的检测以ACTB作为内参。2^-ΔΔCt 法计算 ATP1B3和ENAH 的相对表达水平。