2.3.1琼脂扩散法

将对数生长期的金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，沙门氏菌悬液分别稀释至10⁷ CFU/mL的浓度，然后将100 μL的稀释细菌悬液均匀地涂布在琼脂培养基的表面。均匀涂布后，在每个琼脂培养皿制作3个孔，分别将200 μL不同稀释浓度的防冻消毒液 、碘附以及戊二醛稀释液加入琼脂培养皿的小孔中。随后，将琼脂培养皿置于37℃培养箱中培养16-18h，观察各孔周围的抑菌圈大小。

2.3.2低温杀菌试验

将对数生长期的金黄色葡萄球菌，大肠杆菌，沙门氏菌悬液加入2mL LB肉汤中，使其菌液浓度卫10⁷ CFU /mL，随后将防冻消毒剂、碘附以及戊二醛稀释液加入上述2 LB肉汤中，使得防冻粉的终浓度为5%，10%，20%以及对应浓度的戊二醛和碘液。将含有菌液和消毒剂的试管置于-20℃的冷室中，静止孵育12h后，将菌液按10倍比稀释后，取100μL稀释液均匀涂布到琼脂培养皿，在37℃下孵育24h后进行菌落计数。每个浓度重复3次。