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更新日期:2022-01-14     浏览次数:263
核心提示:2.1 HRCECs细胞培养HRCECs细胞复苏后,用含10%FBS和1%双抗的DMEM高糖培养基,于 37℃、5% CO2 饱和湿度条件下培养。待细胞贴壁长满后,弃去培养液,用

2.1 HRCECs细胞培养

HRCECs细胞复苏后,用含10%FBS和1%双抗的DMEM高糖培养基,于 37℃、5% CO2 饱和湿度条件下培养。待细胞贴壁长满后,弃去培养液,用 PBS 清洗 3 次。加适量 0.25% 胰蛋白酶消化,按 1︰3 的比例传代。取对数生长期细胞用于实验。

2.2 BYHWT、GS对细胞增殖的影响

将细胞以每孔 1×104 个接种于 96 孔培养板,分为对照组和模型组。待细胞单层贴壁生长至50% 左右,对照组加正常培养液,模型组加新配制的不同浓度的BYHWT和GS培养液200 μL(均含10%FBS)。在 37℃、5% CO2 饱和湿度条件下培养,分别于 24、48、72h 倒置显微镜观察细胞形态后,每孔加入10 μLCCK8溶液,继续培养4h后,用酶标仪测定450nm处的吸光度。