1.2.3吡虫啉降解菌株的分离纯化和初步鉴定
将连续稀释涂布和画线分离法相结合,利用含IMI浓度为100 mg/L基础无机盐培养基从BCL菌群中分离菌株。挑选菌落形态明显不同的菌株,再将其分别转接到牛肉膏蛋白胨培养基和LB培养基,进一步对比菌落形态后剔除相似菌株,将最后获得的菌株编号并保藏。采用TIANGEN 基因组 DNA 提取试剂盒步骤要求提取各菌株的 DNA 作为模板,采用16S rRNA 通用引物 27F /1492R扩增目的片段。PCR扩增产物送至上海生工进行测序。菌株16S rRNA 基因序列测序后,在 NCBI 网站上进行相似度比较,并提交到 GenBank 数据库获得菌株序列注册号MW822752(BLE8)、MW822757(BLE10)、OL942751(BCJ1)和MW822754(BLE3-1)。利用 Mega-7软件对获得的菌株 16S rRNA 序列进行多序列拼接,构建系统发育树[25]。