采用微量肉汤稀释法。试验方法、判读标准和质控要求参照2020年美国临床实验室标准化研究所(CLSI)文件的规定。微量肉汤稀释法药敏鉴定板包括:氨苄西林、头孢噻肟、头孢他啶、厄他培南、美罗培南、阿米卡星、阿奇霉素、四环素、复方新诺明、氯霉素、环丙沙星,11种抗生素。
1.6 脉冲场凝胶电泳 ( PFGE ) 分子分型
参照中国疾控中心徐建国团队优化的柠檬酸杆菌PFGE 操作方法[3],对7株弗劳地柠檬酸杆菌进行分子分型,挑取适量过夜培养新鲜细菌培养物进行胶块制备、胶块的裂解、酶切( 限制性内切酶是 XbaⅠ) 、电泳(参数:电压梯度6 V/cm,电泳夹角120°,电泳温度14 ℃,初始转换时间1s,终末转换时间20s,电泳时间19 h),成像,图谱用Bionumerics 软件作数据分析,绘制聚类分析树状图,电泳条带位置优化度设置为1.5%,相似度为100%认定为同一PFGE带型。以沙门菌 H9812 作为统一的分子量标准进行校准。