2020年6月,在山东省威海市杨家湾海域采集鳗草生殖枝并将其装入网袋中,置于海域待种子自然成熟脱落。9月中旬取出网袋,挑选成熟且健康种子,在黑暗、盐度35‰、温度4 ℃的天然海水中保存,每天换水1次。50 d后,选择约长3.5 mm、宽2.0 mm、30粒重0.25 g的种子进行实验。实验前先对种子进行表面消毒:75%酒精浸泡15 s、灭菌海水冲洗3次、20%H2O2浸泡15 min、灭菌海水冲洗3次。
2.2 模拟沉积物
模拟沉积物由采自威海国际海水浴场潮间带的沉积物和粒径2 mm的蛭石按比例混合而成。先用网目直径2 mm的大型底栖动物筛筛分潮间带沉积物,过筛的沉积物在阳光下曝晒72 h备用。实验前,将模拟沉积物用灭菌海水浸泡,并于25 ℃、转速144 r/min振荡24 h,经定性滤纸过滤后,滤液用孔径0.45 μm醋酸纤维膜过滤,用灭菌海水调至盐度14‰,于4 ℃保存以用作培养液。依据薛成凤的方法[13],确定模拟沉积物的容重。