取对数生长期的SCC-4细胞, 胰酶消化后制成单细胞悬液, 调整细胞数为2×104/m L , 按照200μL/孔接种于96孔板中。实验分为空白组（无SCC-4，仅 DMEM 培养基）、对照组（40 μmol/L DMSO）及不同浓度（20、40、80μmol/L）的雷帕霉素给药组,每组设4个复孔。药物与细胞孵育24 h后, 加入MTT溶液(5 mg·m L−1) 20 μL, 继续孵育4 h, 孵育结束弃去培养基。每孔加入DMSO 150 μL,振荡器振荡10 min溶解甲结晶。在酶联免疫检测仪上选择570nm波长，测定各孔光吸收值，记录结果。以用药浓度为横轴，光吸收值（A）为纵轴绘制细胞生长曲线。按公式计算细胞的抑制率, 抑制率(%) = 1−(处理组平均吸光度值−空白组平均吸光度值)/(对照组平均吸光度值−空白组平均吸光度值)×100%。