1.2 实验方案

实验流程图如图1所示。在第15天，所有实验大鼠在半密封的容器内进行预充氧2 min，用6%的七氟烷进行麻醉诱导5 min。大鼠气管内插管成功后顺势连接呼吸机进行机械通气，呼吸频率设为40次/min， I : E = 1 : 1，FiO₂ = 0.5， PEEP = 5 cmH₂O。潮气量大小设定为8 - 12 ml/kg，并在通气期间适当调节以维持呼吸末二氧化碳分压在35 - 45 mmHg之间。以氧气和1.5% - 2.0%浓度的七氟烷混合气体进行麻醉维持。通过加热毯加热使各组间大鼠的鼓膜温度及直肠温度在37 ± 0.5°C范围之间。用肝素化后的穿刺针进行动静脉穿刺并固定，并开始记录平均动脉压（Mean arterial pressure，MAP）和心率（Heart rate，HR）。窒息前5 min静脉给予2 mg/kg的顺式阿曲库铵，然后停用七氟烷，关闭呼吸机，夹闭气管导管，记录窒息开始时间。MAP低于20 mmHg定义为大鼠CA。大鼠窒息期间体温持续维持在37 ± 0.5°C之间。窒息发生8 min后静脉给予0.01 mg/kg的肾上腺素，同时开始进行手动CPR，按压频率保持在200-300次/min，并同时连接呼吸机吸入纯氧。如果胸外按压3 min后未恢复自主循环，则再给予一次0.01 mg/kg肾上腺素，超过5 min仍未恢复自主循环，则视为复苏失败。