乳酸细菌培养基（MRS）：酪胨10.0 g，牛肉粉8.0 g，酵母粉4.0 g，葡萄糖20.0 g，硫酸镁0.2 g，乙酸钠5.0 g，柠檬酸三铵2.0 g，磷酸氢二钾2.0 g，硫酸锰0.05 g，吐温80 1.0 g，蒸馏水1000 mL。用柠檬酸将pH调至6.2±0.2。

用75%的酒精给超净工作台消毒，每个培养皿中倒入15 mL左右MRS培养基，打开紫外灯及风机，待培养基凝固。接种梯度从10^-4至10^-6，每个梯度接种两个培养皿，编号。将培养皿倒置于恒温培养箱中，30 ℃培养72 h^[10]。

1.2.1.2 菌种纯化

从活化菌种的培养基中选择一个菌落，做划线培养，培养基为MRS固体培养基，置于恒温培养箱中，30 ℃培养72 h。

1.2.1.3 扩繁

250 mL锥形瓶中加入7.2 g MRS肉汤+150 mL纯水121 ℃高压灭菌15 min，备用。

从纯化后的菌种中挑取生长最好的一个菌落接种于盛装150 mL MRS液体培养基的锥形瓶中，30 ℃培养72 h。将生长好的菌种取6个1 mL接种于新的6个装有150 mL MRS液体培养基的锥形瓶中，30 ℃培养72 h。