1.3 共价结合法
共价结合是通过在酶的非必需化学基团(如赖氨酸的-NH2、半胱氨酸的-SH、谷氨酸和天冬氨酸的-COOH等)和载体的化学基团之间形成共价键来实现酶的固定化的技术。常见的共价结合方法为硅烷化和醛胺缩合,共价结合法由于漆酶与载体之间结合牢固,具有很高的稳定性,漆酶不易渗漏,重复使用性强[17, 18]。但是剧烈的反应条件会导致漆酶的构象发生变化,酶活性降低,从而限制了其在工业上的广泛应用。
1.4 交联法
交联法是使用双功能或多功能试剂使酶分子之间相互交联呈网状结构的固定化方法。由于酶充当自身的载体,这一过程也被称为无载体固定化。双功能交联剂有二醛、二胺、二酯等,最常用的是戊二醛,由于其具有经济实惠、易得等优点[19]。交联法是一种广泛使用的方法,交联法得到的固定化漆酶在较高的pH和温度条件下表现出良好的稳定性。但其反应条件易使酶活性损失,且交联酶体积较小,使用不方便。