2.1  CCK-8法检测MA对不同细胞增殖影响 

收集对数生长期的PANC-1、PANC-28、BxPC-3，AsPC-1和SW1990细胞，制作细胞悬液，以适当密度将细胞悬液分别接种于96孔板，37 ℃，5% CO2孵箱培养过夜。用培养基稀释200 μmol·L^-1山楂酸储备液为5个浓度梯度，使给药终浓度分别为100、50、25、12.5 、6.25 μmol·L^-1，每个浓度设3个复孔，阴性对照组加等体积各细胞对应的培养基，37 ℃，5% CO2孵箱继续培养48 h。每孔加10 μl CCK-8工作液，继续培养15-45min，用多功能酶标分析检测仪在450 nm波长下检测96孔板各孔的吸光度A值。GraphPad软件计算细胞增殖抑制率及IC50值，并绘制曲线，实验重复三次。

2.2  mRFP-GFP-LC3 转染实验观察细胞自噬

取对数生长期的PANC-1细胞，调整细胞浓度为1×10⁵·ml^-1，接种于预先装好细胞爬片的24孔板，每孔加入细胞悬液600 μl，培养过夜，使细胞贴壁生长。按照50 MOI值计算所需Ad-mCherry-GFP-LC3B重组腺病毒量，冰上解冻，混匀后加入孔板内。病毒感染并继续培养细胞6 h，移去含病毒培养液，加入含山楂酸浓度为30μmol·L^-1的培养基溶液600μl，对照组加同体积培养基。继续培养48 h。吸尽孔板内培养液，PBS清洗，2min×3次；选用4%多聚甲醛固定10min，再次PBS清洗，2min×3次；拍照并统计自噬细胞所占百分比及胞内自噬斑数目。