吸取11.5 mL冰乙酸，加水至100 mL。称取4g氢氧化钠，溶于25 mL水中。将50mL冰乙酸溶液与11.5mL氢氧化钠溶液混合，加水至约900 mL。用冰乙酸溶液或氢氧化钠溶液调节pH至4.50±0.02，然后用水定容至1 L。

1.3.1.2 ONPG底物溶液的配制

称取0.370 g ONPG，加入pH=4.50的缓冲液约50mL，充分搅拌溶解，继续用缓冲液定容至100 mL。该溶液用前配制，在4小时内使用完毕，过时需重新配制。

1.3.2 ONP标准曲线的配制

称取0.139 gONP，加入10 mL无水乙醇，充分溶解后，转移至500 mL容量瓶，并用水定容，其浓度为2 mmol/L，作为储备液。取适量储备液，补加水至7.5 mL，加入1g/100mL碳酸钠溶液2.5 mL，加甲醇定容至25 mL，配成0.005、0.01、0.02、0.04、0.08、0.12、0.15 mmol/L标准系列溶液。