病毒RNA采用Trizol法提取，反转录体系为5× H:script Ⅱ qFT Srper Mix Ⅱ 4μL， RNA 100ng ，dd水补齐至20μL。反应条件为50℃ 15min；85℃ 5s。PRC反应体系：。EX Taq DNA 聚合酶预混剂25μL，底物2μL，水23μL。反应条件：94℃ 3min；94℃ 10s，55℃ 30s，72℃ 2min，共30个循环^[11]。

2.2 目的基因的连接转化

将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，对目的条带进行胶回收，回收产物和pMD18 -T连接，连接产物转化于DH5α感受态细胞。37℃温箱培养16h后挑取阳性菌落送测序。

2.3 分析测序结果

从NCBI选取AY032626 CH-1a等14株PRRSV序列运用Lasergene 7.1进行序列比对和相似性分析，用MEGA-X进行遗传演化分析对测序结果进行序列比对。