将乳清分离蛋白(WPI)与乳糖(D-Lactose, Lac)按1:1溶解于超纯水中,在恒温搅拌台上搅拌12 h,然后存放于-20℃的冰箱冷冻,随后取出放入冻干机冷冻干燥三天,将冻干得到的粉末置于含有饱和溴化钾溶液的容器中,并放入培养箱中在70℃下反应24 h,取出观察其颜色变化,若无明显变化则再次重复上述步骤,直至溶液颜色出现明显变黄,得到糖基化反应产物(WPI-Lac)[22]。
1.3.2茶油纳米乳液的制备
将一定质量的WPI和WPI-Lac分别溶解在一定量的超纯水中,制成浓度为1%的蛋白质溶液 。恒温搅拌至少 2 h(25℃,500 r/min)后,加入万分之二的叠氮化钠。将WPI溶液放入冰箱冷藏11 h,并将冷藏温度调至4℃,使蛋白质充分溶胀。回复至室温,得到水相。将油水按一定比例混合后均质处理(12000 rpm,2 min)及超声处理,得纳米乳液。