1.3.1 DNA提取：室温避光平衡提取试剂及血液样本，吸取25 ul全血DNA提取试剂加入离心管中，吸取25 ul混匀全血加入，轻轻吹打2-3 次，使血液与提取试剂混匀；95 ℃变性裂解5 min；离心1 2000 rpm，2 mim；上清液即为加样液；如不立即检测，2-8 ℃可保存12 h，-20 ℃保存1个月。

1.3.2检测：按试剂说明书进行试剂及样本的添加。将配置好的反应管瞬时离心，放入仪器通道中。打开仪器窗口，设置如下的扩增程序：95  ℃， 10 min（激活荧光基团）；95  ℃，15 秒（使样本变性）；60  ℃，40 秒（使荧光基团与样本充分结合）；重复二、三步骤40 次。室温冷却1 min，完成反应；60 ℃收集FAM和HEX（或VIC）信号，执行程序。分别检测MTHFR基因C677T、A1298C位点与MTRR基因A66G位点的基因多态性。

1.4统计学分析  

统计402 例样本的基因分型频数，进行Hardy-Weinberg遗传平衡检验。使用SPSS 26.0进行基因各位点的分型频率、等位基因频率的c2检验，以P ＜0.050为差异具有统计学意义。