效液相色谱法(HPLC)进行分析
更新日期:2022-08-31     浏览次数:176
核心提示:1.2样品中毒素的提取参考前人的方法[4, 16],从饲料样品中提取AFB1、DON和ZEN。简而言之,将25克粉碎的饲料样品分别与100毫升的甲醇:水(80:20,v/v

1.2样品中毒素的提取

参考前人的方法[4, 16],从饲料样品中提取AFB1、DON和ZEN。简而言之,将25克粉碎的饲料样品分别与100毫升的甲醇:水(80:20,v/v)、甲醇:水(60:40,v/v)或乙腈:水(84:16,v/v)溶液混合,分别进行AFB1、DON或ZEN的分离。样品用商用搅拌器高速搅拌3分钟,用Mycosep® #226柱(Romer Labs. Inc.,新加坡)过滤。用磷酸盐缓冲盐水溶液(PBS,pH7.4)稀释溶剂提取物,然后用PBS和甲醇水溶液清洗,通过免疫亲和柱;AFB1和DON分别用AokinImmunoClean CF AFLA和CF DON(Aokin AG,德国)检测,ZEN用ZearaStar(Romer Labs,奥地利)检测。最后,用甲醇将霉菌毒素从色谱柱中洗脱出来,并用氮吹仪浓缩。然后将霉菌毒素重新溶解在下述流动相中,通过Millex PTFE 0.22 μm过滤器(Merck,中国天津)过滤,并通过高效液相色谱法(HPLC)进行分析。

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