核心提示:《构建一个简便的BVDV反向遗传系统》为作者:秦春雪最新的研究成果,本论文的主要观点为摘要:[目的]克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获
《构建一个简便的BVDV反向遗传系统》为作者:秦春雪最新的研究成果,本论文的主要观点为摘要:[目的]克隆牛病毒性腹泻病毒Singer_Arg株全长cDNA,并获得BVDV感染性RNA,用于BVDV疫苗研制。[方法]本研究将BVDV分段克隆后拼接成全长cDNA质粒,通过在其5′UTR前添加CMV启动子、锤头状核酶和3′UTR后添加丁型肝炎病毒核酶序列的方法,获得不经体外转录,直接转染细胞产生BVDV感染性RNA的反向遗传操作系统。[结果]成功构建出BVDV全长cDNA质粒和反向遗传的子代BVDV,通过Western blot、PCR技术、免疫荧光等方法对该病毒进行了一系列鉴定分析,结果均表明拯救出的BVDV具有感染性。[结论]可以通过直接转染质粒的方式获得BVDV,为BVDV疫苗研制奠定了重要基