1.资料与方法
1.1一般资料:
选自2003年1月--2016年1月在我院就诊14—23周无生机儿PPROM 200例。破水量从阴道窥视肉眼未见流液但胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)测试阳性到阴道多量流液不等。入组前均详细告知无生机的 PPROM保胎的风险,签属同意书后坚决要求保胎,入组患者均排除宫口已扩张,宫颈机能不全,胎位不正,子宫畸形,多胎,已明确宫内感染诊断者,继续妊娠危及母婴生命的严重并发症患者。入组者入院后行阴道分泌物常规检测,支原体、衣原体、淋球菌、加德纳菌、B 族链球菌 ( GBS)培养及假丝酵母菌,滴虫常规镜检检查。
1.2 诊断依据:
(1)患者自觉突然有不能控制的阴道流液,腹压增加时更加明显,量多少及持续时间不等;阴道窥视时见液体自宫颈流出或阴道后穹窿有含胎脂积液;(2)阴道液測PH试纸为蓝色变;(3)阴道后穹窿液涂片可找到羊齿状结晶;(4)对有疑问者,可通过测定宫颈-阴道分泌液中的胎儿纤维结合素(fFN)、胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1)等方法予以确诊。
1.3标本采集方法:
孕妇取截石位 ,常规消毒外阴 ,然后用扩阴器充分暴露阴道壁及宫颈,对分泌物性状和量、宫颈情况进行仔细地观察,并做好记录。采用3支无菌棉签在距阴道外口 5 cm 阴道下1/3处取阴道分泌物做GBS,加德纳培养;再用棉球去除宫颈阴道部多余的分泌物 , 取另3支无菌棉签各放置在宫颈管内 1~2 cm 处,停留 5s 后旋转2-3圈后取出 ,取出时注意不要触及阴道壁,实施衣原体 、支原体、淋球菌培养,然后进行密封送检。阴道毛滴虫、阴道假丝酵母菌检测 :以无菌窥阴器暴露阴道 , 消毒棉签蘸取无菌生理盐水后取阴道侧壁分泌物 , 将分泌物放在干净的试管内 , 送检验科常规镜检 , 发现滴虫、芽苞和假菌丝、线索细胞为阳性。
1.4检测方法(1)GV检测采用免疫荧光法,取样后即刻玻片固定后免疫荧光试剂染色,再37度电热恒温水浴中孵育30分钟后洗涤,再荧光显微镜100倍油镜镜检。其中荧光试剂盒由深圳市迈科龙生物技术有限公司提供,电热恒温水浴槽由上海景迈仪器设备有限公司生产。(2)支原体检测采用培养基培养法,主要是UU、MH两种,采取标本加入培养基中充分混匀,再放入加入监测卡的各孔,盖上监测咔盖,放37度孵箱培养,24和48小时各观察结果,通过比色卡来进行定性判断。试剂盒由珠海迪尔生物工程有限公司提供。(3)CT检测采用乳胶法,采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析技术,试剂含有被预先固定于膜上监测区(T)的衣原体抗体,通过检测区颜色变化来定性判断。试剂盒由杭州艾博生物医药有限公司提供。(4)淋病奈瑟氏菌检测采用巧克力琼脂培养基培养法定性判断。试剂盒由由上海科玛嘉微生物技术有限公司提供。(5)GBS培养琼脂培养基培养法,试剂由郑州贝瑞特生物技术有限责任公司提供的哥伦比亚血琼脂培养基。(6)阴道毛滴虫、假丝酵母菌检测 :取放在干净的试管阴道分泌物 , 常规镜检 , 发现滴虫、芽苞和假菌丝为阳性。
2.结果
200例中95例支原体阳性(包括解脲支原体或人型支原体或两者都阳性),7例淋球菌阳性,46例加德纳菌阳性,45例假丝酵母菌,阳性,31例链球菌(GBS)阳性,滴虫6例,17例患者以上病原菌培养阴性。其中三种以上病原菌感染23例,两种感染56例,一种感染104例,病原菌总感染率高达91.5%。妊娠结局有200例中40例成功保胎至孕26周,160例因宫内感染,持续阴道流液,胎盘早剥,难免流产等在小于孕26周终止妊娠。40例保胎成功者中其中三种病原菌以上感染的1例,两种以上病原菌感染的6例,一种病原菌感染的21例,培养无以上病原菌感染的12例。