杨梅(Myrica．rubra Sieb．et Zucc)为杨梅科杨梅属植物，为我国特产，主要分布于长江流域以南，以浙江、江苏、福建及广东等省为主要产区。杨梅茎皮中含多种有机化合物，主要由黄酮类化合物及原花色素类化合物组成，这两类化合物均有显著的生理活性，近代医学给予杨梅极高的评价：杨梅具有消食、御寒、消暑、止泻、利尿、治痢以及生津止渴、清肠胃、除烦愤恶气等多种药用价值［1］。本实验研究杨梅茎皮对对小鼠急性实验性肝损伤的保护作用
1 材料与仪器
1．1 动物 昆明种小鼠168只，雌雄各半，体量体重(20．0±2．1)g，由华中科技大学同济医学院提供。
1．2 试药 杨梅茎皮采自湖北民族学院果园；杨梅干燥茎皮水煎液：取杨梅茎，去皮后将杨梅茎皮晒干，用水煎煮3次，过滤后浓缩成高剂量（2.0g／ml）溶液、中剂量（1.0g／ml）溶液及低溶剂（0.5g／ml）溶液，即得，以下简称高剂量组、中剂量组及低剂量组；
1．3 试剂D-半乳糖胺(上海楷洋生物技术有限公司产品)；实验用酒精；谷丙转氨酶(ALT)及谷草转氨酶(AST)测定试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司产品)；护肝片(北京亚东生物制药有限公司产品）。
1．4 仪器 台式80-2型电动离心机（金坛市富华仪器有限公司）；BS224S型电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
2 方法
2．1 对酒精所致实验性肝损伤的影响［2，3］
取健康小鼠84只，雌雄各半，随机分为6组，每组14只，分别为正常组、模型组、
基金项目：湖北民族学院大学生素质拓展基地项目（2008ST005）
作者简介：刘文洲（1986-），男（汉族），广东饶平人，现湖北民族学院医学院06级中西医临床专业学生
高剂量组(2.0g／ml)、中剂量组(1.0g／ml )、低剂量组(0.5g／ml )及护肝片组。护肝片组、杨梅茎皮高、中、低剂量组小鼠均按20ml·kg-1 灌胃给药，正常组及模型组小鼠灌胃给等体
积生理盐水，2次／d，连续给药8d。于第8天第2次给药8h后，除正常组外，其余各组小鼠均灌胃给50%酒精溶液，20ml·kg-1，正常组小鼠灌胃给等体积蒸馏水。末次给药4h后摘眼球取血，分离血清，分别检测ALT和AST活性。取肝脏称重，计算肝脏系数。
2．2 对D—GaIN所致急性实验性肝损伤的影响[4]
分组及给药方法同上，于第8天第2次给药1h后，除正常组外，其余各组小鼠均腹腔注射D—GaIN，（0.45g·kg-1），正常组小鼠腹腔注射等体积蒸馏水。末次给药16h后摘眼球取血，分离血清，分别检测ATL 和AST活性。采血后，快速颈椎脱臼处死小鼠，取出整个肝脏用生理盐水漂洗，除去血液，滤纸拭干，称重，计算肝脏系数。
2．3 计算肝脏系数 肝脏系数=肝脏重量(mg)／体质量(g)×l00％
2．4 数据处理 所有数据采用SPSS 10．0统计软件t 检验统计处理。
3 结果
3．1杨梅茎皮对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤的影响 见表1。
表1 杨梅茎皮对酒精所致小鼠肝损伤血清ALT 、AST和肝脏系数的影响(
)
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组别 剂量 ALT AST 肝脏系数
C/g·kg-1 ·d-1 /U·L-1 /U·L-1 /mg·g-1
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正常组 ----- 30.92±4.84 103.63±13.81 46.27±6.16
模型组 ----- 42.45±5.47** 133.73±12.16* 60.34±7.63**
高剂量组 4 0×8 35.50±4.39▲▲ 117.48±9.87▲ 50.43±5.77▲▲
中剂量组 2 0×8 37.92±5.97**▲ 121.68±12.07▲▲ 53.81±6.19▲▲
低剂量组 1 0×8 39.75±6.09▲ 124.25±14.25*▲▲ 55.32±5.83▲
护肝片组 0.6×8 37.06±5.62** 119.44±10.30▲▲ 54.03±4.97▲
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与正常组比较，*P<0.05，** P<0.01；与模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；n=14
由表1可知，酒精模型组与正常组比较，血清ALT、AST活性和肝脏系数显著升高(P<0．01，P<0．05)，表明造模成功；与模型组比较，杨梅茎皮各剂量组均能明显抑制血清ALT、AST和肝脏系数的升高 (P<0．01或P<0．05)。实验显示杨梅茎皮对酒精所致小鼠急性实验性肝损伤有一定的保护作用。
3．2 杨梅茎皮对D-GaIN所致小鼠急性实验性肝损伤的影响 见表2。
表2 杨梅茎皮对D-GaIN所致小鼠肝损伤血清ALT 、AST和肝脏系数的影响()
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组别 剂量 ALT AST 肝脏系数
C/g·kg-1 ·d-1 /U·L-1 /U·L-1 /mg·g-1
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正常组 ----- 26.28±3.55 98.85±11.26 47.39±5.64
模型组 ----- 40.26±4.79** 128.39±12.56** 58.29±6.96**
高剂量组 4 0×8 33.18±5.05*▲ 111.52±10.36▲ 51.86±4.97▲▲
中剂量组 2 0×8 34.87±5.57**▲ 114.81±11.40▲ 52.11±5.24*▲
低剂量组 1 0×8 36.04±6.36**▲ 116.53±12.02*▲▲ 52.32±6.13▲
护肝片组 0.6×8 35.85±5.77** 115.86±12.84▲▲ 51.94±5.67▲
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与正常组比较，*P<0.05，** P<0.01；与模型组比较，▲P<0.05，▲▲P<0.01；n=14
由表2可知，D-GaIN模型组与正常组比较，血清ALT、AST活性和肝脏系数
显著升高(P<0．01)，表明造模成功；与模型组比较，杨梅各剂量组均能明显抑制血清ALT、AST和肝脏系数的升高 (P<0．01或P<0．05)。实验结果显示杨梅对D-GaIN所致小鼠急性实验性肝损伤有一定的保护作用。
4 讨论
肝损伤可由病毒、生物、药物、理化、酒精等因素所致，当肝细胞受损时，细胞内ALT、AST等会释放人血，血清ALT和AST目前仍被认为是反映肝损伤的敏感指标[5]。本研究通过制造小鼠急性实验性肝损伤动物模型，检测血清ALT、AST活性和肝脏系数来判断肝损伤的程度和药物治疗肝损伤的效果，实验结果表明杨梅茎皮不同水煎液剂量对小鼠急性实验性肝损伤具有保护作用，这可能和杨梅含有丰富多糖类物质、黄酮类化合物及原花色素类等化合物有关，其机制有待进一步研究。
D-GlaN是肝细胞内尿苷二磷酸葡萄糖的干扰剂。D-GlaN可造成肝弥漫性坏死或炎症，是目前最接近人临床病毒性肝炎病理变化的模型。酒精则是通过激活氧分子产生自由基，使肝细胞膜的脂质过氧化和消耗还原性谷胱甘肽，另外，酒精大量脱氢氧化，使三羧酸循环障碍和脂肪酸氧化减弱而影响脂肪代谢，从而导致肝细胞损伤[6]。
本实验结果提示杨梅茎皮能对酒精、D-GaIN所致小鼠急性实验性肝损伤血清ALT 和AST活性及肝脏系数的异常升高具有显著的抑制作用，但具体的保肝作用机理还有待进一步研究。
参考文献：
[1] 刘文洲，滕有明，谭志鑫等．杨梅茎皮镇痛和免疫作用的实验研究[J]．时珍国医医药，2010，(6)：1416～1417。
[2] 陈奇．中药药理研究方法学，第2版[M]．北京：人民卫生出版社，2006：844。
[3] 周添浓，侯少贞，李耿，等．灵黄护肝胶囊对小鼠急性肝损伤的保护作用[J]．广西中医药，2007，30(4)：58。
[4] 谢文利，朱江，晋玉章．诺丽果汁对D-半乳糖胺致肝损伤的保护作用[J]．食品研究与
开发，2008，29(9)：17。
[5] 谢文利，朱江，晋玉章．诺丽果汁对D-半乳糖胺致肝损伤的保护作用[J]．食品研究与
开发，2008，29(9)：17。
[6] 郭美仙，刘 明，施贵荣等．苦石莲对小鼠急性实验性肝损伤的保护作用[J]．时珍国医国药，2009，20(11)：2786-2787。
