炎症是动物机体对局部损伤及致炎因子所产生的以防御为主的应答性反应,主要表现为红、肿、热、痛,常引起血液循环障碍、炎症因子的释放和组织变性坏死,对机体产生危害甚至危及生命[1]。类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis, RA)是一类以多个关节受累、关节滑膜炎、功能障碍为主要特征的自身免疫性疾病[2]。佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, AA)与类风湿性关节炎在足趾肿胀、骨损伤、淋巴细胞浸润等病理特征相似。蒲公英(Herba Taraxaci)作为传统中药,具有消炎抗菌、清热解毒、消肿散结、保肝利胆等功效[3],现代药理学表明,蒲公英具有抗疲劳、抗氧化、抗炎等多种作用,但对关节炎的治疗方面尚未研究。本实验研究蒲公英提取物对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用,为蒲公英的临床应用与开发利用提供可靠的理论依据。
1试验材料
1.1 试验动物 大鼠,200g ±20g,雄性,购自延边大学实验动物中心。
1.2 药品与试剂 蒲公英全草购于北京同仁堂;弗氏完全佐剂购于Sigma公司,卡介苗购于上海生物制品研究所,氨甲喋呤购于上海信谊药厂有限公司(批号:H31020644),NO购于碧云天生物技术公司,IL-1β、TNF-α 试剂盒购于R&D公司。
2试验方法
2.1蒲公英提取物的制备 采用水提法:称取1000g蒲公英全草,用纱布包裹,浸泡过夜,反复煎煮数次,合并滤液并浓缩至1g/L。
2.2模型建立、分组与给药 完全弗氏佐剂与卡介苗混合,使之形成乳剂,卡介苗的含量为10mg/mL。取0.1 mL注射于大鼠右后足趾皮内,空白组注射等量生理盐水,于造模后次日灌胃给药。将大鼠随机分为空白组、模型组、阳性组和提取物高、中、低剂量组,每组6只,药物组分别给与蒲公英提取物10、5、2.5 g/kg,连续灌胃28d,模型组给予同体积生理盐水,阳性组给予氨甲喋呤(7.5mg/kg),每周灌胃1次。
2.3 各指标的检测 于造模后第0、4、8、12、16、20、24、28d分别测量大鼠体重进行比较,第29d处死大鼠,分离血清,剥离脾脏、胸腺。称其质量,计算脏器指数,脏器指数=脏器质量(mg)/体质量(g)。采用Griess法检测血清中NO的含量;采用ELISA法检测血清中IL-1β 和TNF-α 的含量。