1.1  材料与试剂

新鲜栉孔扇贝（Chlamys farreri）（烟台红利水产市场）；硫酸铵、氢氧化钠（国药集团化学试剂有限公司）；福林试剂（北京索莱宝科技有限公司）。所用试剂均为分析纯。

1.2  仪器与设备

FJ200高速分散均质机（上海标本模型厂）；PHS-3C酸度计（赛多利斯科学仪器北京有限公司）；81-2磁力搅拌器（上海梅颖浦仪器仪表制造有限公司）；SHP-250生化培养箱（上海培因仪器公司）；FC酶标仪（美国热电公司）；LGJ-18s真空冷冻干燥器（北京松原）。

1.3  方法

1.3.1  粗蛋白含量的测定 

采用凯氏定氮法[7]测定粗蛋白质的含量。

1.3.2  可溶性蛋白含量的测定 

参考福林酚试剂法[8]测定可溶性蛋白含量。

1.3.3  蛋白质提取制备工艺流程 

调整料液比(W/W)，将料液在均质机中均质3 min，调整pH并进行恒温水浴，提取液于8000 r/min离心15 min，取上清液，加入硫酸铵并迅速搅拌使其溶解，于4 ℃条件下反应30 min、8000 r/min离心3 min后取上清液，再次加入硫酸铵并进行迅速搅拌，在4 ℃条件下反应4 h，8000 r/min离心3 min，取蛋白质沉淀，加pH为7.2的磷酸缓冲液进行溶解，ddH2O透析24 h，真空冷冻干燥器冻干24 h，得到蛋白质冻干品。

1.3.4  碱溶法提取蛋白质参数的确定

1.3.4.1  pH

调整料液比为1:10(W/W)，均质3 min，将样液的pH分别调节至7、8、9、10、11、12，在温度35 ℃下提取1.5 h，研究不同pH值对蛋白质提取率的影响。

1.3.4.2  温度

调整料液比为1:10(W/W)，均质3 min，调节样液pH至11，分别在温度30、35、40、45、50、55 ℃下提取1.5 h，研究不同温度对蛋白质提取率的影响。

1.3.4.3  料液比

调整料液比分别至1:5、1:10、1:15、1:20、1:25、1:30 (W/W)，均质3 min，调节样液pH至11，在温度40 ℃下提取2 h，研究不同料液比为对蛋白质提取率的影响。