1.1 肿瘤干细胞的产生

长达一个世纪的研究和结果都表明，在肿瘤中存在着极少数的具有自我更新和分化成其他组织类型能力的细胞，即“肿瘤干细胞”。它们是一些极少数的、具有自我更新潜能的、驱使肿瘤形成的细胞。由此可见，肿瘤干细胞在恶性肿瘤的形成和发展中具有相当重要的地位，消灭了肿瘤干细胞就有望消灭恶性肿瘤细胞，治愈威胁人类健康的恶性肿瘤疾病。

肿瘤细胞在结构、分子标记和生物学特性上都与干细胞有许多共同点，主要由以下三个阶段组成：成体干细胞、基因突变的成体干细胞、肿瘤干细胞。肿瘤干细胞产生的主要过程为正常的人体体内的干细胞，受到内源性外物的刺激或诱导，发生基因突变后的生成产物迅速进入细胞周期，并快速地分裂转变为肿瘤干细胞。

通俗地讲，肿瘤干细胞其实也就是肿瘤的起始细胞，是一群具有自我更新能力和多向分化潜能的肿瘤细胞。它同时还具有正常干细胞的保护功能。在大多数时候，肿瘤干细胞处于静止状态，只是偶然被唤醒而进行分裂、分化。

2肿瘤干细胞的分离

肿瘤干细胞的发现使得人们对肿瘤的生物学行为、预后及其发生发展机制的认识更加清晰，也为肿瘤的临床治疗提供了新的靶标。虽然绝大多数人持肿瘤细胞起源于干细胞的观点，但要有力证实肿瘤干细胞的存在，必须把肿瘤干细胞分离纯化成不同的亚细胞群，进行体内外功能的检测。目前限制肿瘤干细胞研究的主要难题是如何从临床肿瘤组织中获得肿瘤干细胞并将其进行体外培养，保持其在传代过程中不分化，以及满足后续实验需求。文献报道的分离方法主要有免疫磁珠分选、流式细胞分选、生物学特性分离、旁群细胞分选法、无血清培养基分选法等分离方法^[9-10]。目前广泛使用的细胞分选是免疫磁珠分选和流式细胞分选两种方法。